2025年高考生物復習胡蘿卜的組織培養
來源:網絡整理 2024-11-20 08:45:50
一、實驗目的:
胡蘿卜是細胞和組織培養中常用的經典材料,是教學實驗的良好材料。通過本實驗實訓,要求學生熟悉胡蘿卜離體根培養的基本方法和步驟,掌握愈傷組織誘導的基本技能。
二、實驗原理:
植物體的莖,根,葉細胞一般都具有全能性,在一定條件的營養和激素等條件下,
可以脫分化形成愈傷組織。將愈傷組織轉 接到含有不同激素成分的培養基上,就可以誘導其再分化生成胚狀體或叢芽,進而發育成完整的小植株。植物組織培養的全過程,證明了分化的植物細胞,仍具有形成完整植株所需要的全部基因。
三、實驗用具:超凈臺 解剖刀 刮皮刀 不銹鋼打孔器 培養皿 溫箱
四、方法步驟:
1. 將胡蘿卜用自來水沖洗干凈,用刮皮刀除去表皮1-2mm,橫切成大約10mm厚的切片。以下步驟均在無菌條件下進行。
2. 胡蘿卜片經70%乙醇處理30秒鐘后,用無菌水沖洗一遍,再用、2%的次氯酸鈉溶液浸泡10分鐘,無菌水沖洗3~4次。
3. 將胡蘿卜片放入培養皿中,一手用鑷子固定胡蘿卜片,一手用打孔器垂直打孔,每個小孔打在靠近維管形成層的區域,務必打穿組織。然后從組織片中抽出打孔器,將胡蘿卜組織片收集在裝有無菌水的培養皿。重復打孔步驟,直至收集到足夠數量的組織圓片。
4. 用鑷子取出組織圓片,放入培養皿中,用刀片將組織圓片切成2mm長的小塊,放入裝有無菌水的培養皿中。在整個操作過程中鑷子和解剖刀要多次火焰消毒,冷卻后再使用。
5、將胡蘿卜組織小塊放到滅過菌的濾紙上,吸干水分后接種到培養基表面。注意接種時培養瓶要有一定傾斜度,接種過程中鑷子不要直接在培養基上方完成,以減少污染機會。
6、將培養物一部分置于25。C溫箱中暗培養,另一部分到光照培養室中進行培養,以比較光照和暗培養對愈傷組織誘導的反應。
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